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如何避免細胞培養(yǎng)板產(chǎn)生污染物?

發(fā)布日期: 2019-10-28
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  細胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)組織取出細胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境下,使其生長繁殖,并維持其結(jié)構(gòu)和功能的一種培養(yǎng)技術(shù)。細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)物可以是單個細胞,也可以是細胞群,常規(guī)操作有細胞接種和傳代、細胞換液、細胞計數(shù)、細胞凍存及復(fù)蘇等。細胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗?zāi)康亩?。細胞培養(yǎng)板在進行細胞操作時同樣遵循嚴格無菌的原則,各項操作要保證規(guī)范、科學(xué),不對細胞的生長造成額外的影響。96,24孔細胞培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿的蓋子都很松,這樣是方便了透氣,但是細菌、霉菌等污染物會不會也隨著溜進去呢?
  蓋子很松,屬于半開放培養(yǎng),這樣的目的是透氣(實際上是為了使培養(yǎng)皿外的CO2能夠與培養(yǎng)皿充分交換,維持培養(yǎng)基的pH值)。
  凡事有利必有弊,這樣當然增加了污染的可能性。此外這樣還會使培養(yǎng)皿內(nèi)的液體蒸發(fā),這對于定量的藥物來說就顯得值得注意了。所以以下二條措施是必須的a培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須清潔(定期紫外線照,酒精擦洗,盡量少開關(guān)培養(yǎng)箱)b培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度必須始終保持為100%(培養(yǎng)箱內(nèi)放置無菌蒸餾水的水槽)。
  就好像培養(yǎng)皿,也是一個蓋倒扣的容器,也不會污染。主要是因為蓋子“L”型邊緣產(chǎn)生氣流負壓的緣故,灰塵上面才附著有微生物,而氣流攜帶的灰塵是無法通過產(chǎn)生負壓的蓋邊緣的。而透氣作用只是通過空氣的擴散,不會產(chǎn)生氣流,所以只會透氣不會透菌。